(資料圖)

近日，中國科學院深圳先進技術(shù)研究院楊慧研究員團隊在化學綜合性學術(shù)期刊《中國化學快報》上發(fā)表了最新研究成果。他們提出了一種基于微納流控平臺的細胞外囊泡熒光標記新策略，以實現(xiàn)細胞外囊泡的精確測量和熒光成像。

細胞外囊泡(EVs)是由細胞主動釋放的、具有膜結(jié)構(gòu)的納米級囊泡，攜帶核酸、蛋白質(zhì)和脂質(zhì)等生物活性分子，從而實現(xiàn)細胞間的物質(zhì)交換。然而長期以來，由于其百納米級的尺寸特性，難以實現(xiàn)可靠的可視化熒光檢測，限制了對細胞外囊泡的深入研究。

目前常用的細胞外囊泡熒光標記方法主要包括：膜蛋白熒光探針標記、親脂性熒光染料標記。熒光蛋白探針體積大、空間位阻大，且細胞外囊泡膜蛋白豐度低、異質(zhì)性強，極大限制了熒光標記效率;而親脂性熒光染料具有操作簡單、熒光強度高、分子尺寸小等優(yōu)點，適用于細胞外囊泡的高效標記及下游檢測?！伴L期以來，受限于親脂性熒光染料本身的理化性質(zhì)，較高濃度下極易出現(xiàn)染料分子團聚，形成與細胞外囊泡尺寸大小相近的納米顆粒，產(chǎn)生假陽性信號，導致了針對細胞外囊泡的檢測結(jié)果不準、測量出現(xiàn)偏差等問題?！睏罨劢榻B。

為解決上述難題，團隊提出了利用微納流控技術(shù)，通過對細胞外囊泡進行快速高效處理，增加細胞外囊泡膜的流動性，實現(xiàn)在極低染料濃度下的高效熒光標記。對比目前實驗操作流程的“金標準”，該方法在染料濃度降低數(shù)倍的條件下，極大提高了外囊泡的熒光標記效率，從而實現(xiàn)了高效的細胞外囊泡流式檢測及細胞內(nèi)熒光成像。

細胞外囊泡熒光標記技術(shù)是當前研究的熱點之一，對細胞外囊泡的生物學功能解析具有重要意義。此項研究提出的基于微納流控平臺的高效細胞外囊泡熒光標記方法，為細胞外囊泡研究提供了新思路和技術(shù)支持。楊慧表示，該方法在未來有望推動細胞外囊泡的精確測量及熒光成像技術(shù)的發(fā)展，成為一種強大而通用的技術(shù)平臺。

關(guān)鍵詞：